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T4 DNA聚合酶是用于无连接酶克隆(LIC)过程中的一种有效的酶促工具,这种技术允许将DNA片段插入质粒载体,而不需要传统的限制性内切酶消化和连接步骤。在LIC过程中,利用T4 DNA聚合酶的3′外切酶活性在DNA片段上产生单链悬垂,然后通过载体上的互补悬垂重组,从而插入片段。在LIC过程中,T4 DNA聚合酶与设计为缺少12–15 bp序列dATP、dTTP、dCTP或dGTP之一的互补引物结合,产生固定长度的单链互补悬垂。这种重组技术随后可以直接转化到大肠杆菌中,大肠杆菌修复了有缺口的DNA主干,从而成功地将DNA片段插入载体,官网链接:https://www.sigmaaldrich.cn/product/mm/70099m
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