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保存说明:
4℃保存,一年有效。
使用说明:
细胞收集
a. 对于贴壁细胞:
除去培养液后用无菌PBS轻轻洗涤细胞一次去除残留血清,加入适量胰酶消化液(DW0007/DW008/DW009)消化细胞,常显微镜观察细胞变圆或肉眼观察细胞间出现缝隙时即为消化好。迅速加入同等体积的血清,终止消化,用移液器轻轻吹打细胞,吹打细胞过程要适当轻柔,否则会影响复苏时细胞存活率。
b. 对于悬浮细胞:直接从b步骤开始进行细胞收集。
将细胞悬液移至离心管中,如15ml离心管。
细胞计数,计算出细胞总数和所需细胞冻存液的量。细胞的冻存密度一般为1×106~1×107 cells/ml。
1500rpm(此为参考转速),离心5-10min,弃上清。离心具体速度和时间取决于细胞类型。
冻存处理:
a. 加入适量细胞冻存液,吹打以重悬细胞,根据细胞类型调整细胞密度(一般为1×106 cells/ml或更高)。
b. 分装于细胞冻存管中,并做好标识。
c. 将细胞冻存管直接放入-80℃冰箱保存。